影片开头承接了游戏《雷顿教授与最后的时间旅行》的情节，教授成功地使塔楼内的大钟重新报时，钟楼的巨门打开后，雷顿教授和路克发现他们正站在伦敦大本钟塔顶。 路克相当羡慕雷顿教授的风度，尤其是在说“那个人就是你”这句名言时的样子。于是他在书房里反复练习这个动作，结果一转身，刚好指到走进书房的教授，非常尴尬。教授给路克听了一首歌星杰妮丝·卡托伦的歌，这就是教授与路克最初的解谜之旅。 进入正题，杰妮丝给雷顿教授写了一封信，告诉教授她一年前病逝的好友米丽娜·维斯拉，作曲家奥兹罗·维斯拉的女儿，竟然以一个7岁小女孩的身份复活了，并声称她获得了“永远的生命”。随信还附两张歌剧门票——这是将由杰妮丝主演的、维斯拉十年磨一剑的歌剧《永远的王国》，并将使用新式乐器Detragon——类似管风琴，可用一人之力奏出整个管弦乐队的音色——来演奏。这部歌剧内容与传说中的不老不死王国安布罗西亚关系很大，雷顿教授的老师修雷达博士也参与这项研究。 蕾米将教授的小车开的飞快，把后座的路克颠得够呛。克朗·白格尼歌剧院据说是按照安布罗西亚的样子建造的，位于海边平台上。歌剧非常精彩，但大家都听得心不在焉，鼓掌的唯有教授和路克。正当两人疑惑时，舞台上出现一假面男，告知大家有关“永远的生命”的竞逐规则。一听说角逐“永远的生命”失败需要以自己的生命为代价时，出现了大骚动，许多人争先恐后想逃出剧场，然而，歌剧演员中竟有一大半都是假面人的手下！地板打开，试图逃跑者全掉了下去。突然，格罗斯基警部冲上舞台，给假面人带上了手铐，将他逮捕。结果假面人的身体像气球一样越涨越大，带着警官一同飞了出去。同时，天花板被打开，歌剧院变成了一艘大船！ 大家急切不已。有人试图跳海，却发现水中有鲨鱼！船上到处慌乱不堪，唯有底层甲板上，妮娜（即“复活的”米丽娜）独自哼着一首叫“海之歌”的曲子。格罗斯基警部与鲨鱼搏斗，奋力冲上船，听到妮娜的歌声却不见人影，以为她落水了，赶紧寻找。同样镇静的还有维斯拉，他不顾人们不满弹奏起音乐，妮娜一听到音乐声立刻将警部踢飞。格罗斯基警部再次落水。 谜题001——最古老的东西 这时，广播要求大家聚集在“最古老的东西”下面，并给出了一首曲子的时间限制。多数人选择了剧场大厅外摆放的一些化石等。教授则带领路克、杰妮丝留在大厅。原来，最古老的东西正是大厅上方的天空。大厅外的地板打开，外面的人全掉了下去。这时，又一道谜题出现了。